碱性磷酸酶有哪些作用？

碱性磷酸酶有哪些作用？

分子克隆中使用的碱性磷酸酶（alkaline：phosphatase）主要来源于牛小肠碱性磷酸酶（Calf：intestinal：alkaline：phosphatase），简称CIP或CIAP，也有来自细菌的碱性磷酸酶（Bacterial：alkaline：phosphatase，BAP）和虾的碱性磷酸酶（Shrimp：alkaline：phosphatase，SAP），它们均能催化除去DNA或RNA5′-P的反应。通过去除5′-P，可用于防止DNA片段自身连接，或标记（5′端）前除去DNA或RNA5′-P。CIAP可用蛋白酶K消化灭活，或75摄氏度处理10：min，然后用酚氯仿抽提，纯化去磷酸化的DNA，从而去除CIAP的活性。与CIAP不同，SAP在65摄氏度处理15：min后不可逆地失去活性，因此在去除残留的酶活性方面SAP更有优势。